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编码基因过表达

产品简介

编码基因过表达(Over-Expression,OE)库基因研究中常需要通过上调靶基因的表达来观察表型变化。过表达(Over-Expression,OE)是上调基因表达最常用的方法,其基本原理是将目的基因的编码区(coding sequence,CDS)构建到质粒或病毒载体中,导入细胞内使基因的表达量增加。根据用途,载体主要分为克隆载体、原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、逆转录病毒载体等。

过表达

过表达如何选择合适的载体呢?

首先我们需要考虑这几个方面:

1.工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;

2.工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;

3.工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。


质粒 慢病毒 腺病毒 腺相关病毒
外源基因表达时间 24h开始表达
持续3-7天
2-4天开始表达
长时间稳定表达
1-2天开始表达
持续7-14天
7-14开始表达
细胞分裂不旺盛部位可长时间表达
插入片段大小 < 5-8kb < 4kb < 5-8kb <2.8kb (包括必须的启动
子以及荧光或者标签元件)
稳定细胞株筛选 可以,但较难操作 可以,外源基因整合于
主基因组,筛选简单
不可以,瞬时表达外源
基因传代后效果减弱
不可以
细胞实验 细胞系,部分细胞
转染效率较低
首选,
广谱,感染效率高
广谱,感染效率高,
适合原代非增殖细胞感染
不适合细胞实验
动物实验 不适合 适合,
根据观察时间
和注射部位选择
较适合(免疫原性高),
根据观察时间和注射部位选择
首选,
根据观察时间和注射部位选择
滴度 最高可达109TU/ml 高达1012pfu/ml 高达1012-13v.g/ml


其次,我们需要了解载体中的每一个元件代表什么。实际应用中,可根据实验目的来挑选合适的载体元件。下面是载体图谱上常见元件介绍:如启动子、荧光标签、抗性、多克隆酶切位点MCS等。




产品介绍

开yun体育app官方下载提供过表达质粒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒AAV等产品。

类别 产品名称 简介 产品规格
质粒 cDNA克隆(现货) 提供无错义、插入、缺失、颠倒、移码突变的CDS模版序列 10ug
过表达质粒

用于过表达编码基因/IncRNA

10ug (含等量对照)
慢病毒 过表达慢病毒(现货) 用于过表达编码基因/IncRNA 5E+7TU/1E+8TU
(含等量对照)
过表达慢病毒 用于过表达编码基因/IncRNA 1E+8TU (含等量对照)
过表达慢病毒(Tet-on ) Tet on诱导过表达慢病毒 1E+8TU (含等量对照)
腺病毒 过表达腺病毒(现货) 用于过表达编码基因/IncRNA 2E+10PFU (含等量对照)
过表达腺病毒 用于过表达编码基因/IncRNA 2E+10PFU(含等量对照)
腺相关病毒 工具腺相关病毒(现货) 光遗传、化学遗传、钙指示剂、
荧光示踪、重组酶等108种现货AAV
1E+12v.g.-1E+13v.g
过表达腺相关病毒 用于过表达编码基因/IncRNA 1E+12v.g (含等量对照)

载体选择

开yun体育app官方下载提供用于过表达编码基因和非编码基因的质粒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等多种载体。点击查看载体图谱>>

产品类别 载体编号 元件顺序
质粒过表达 GV609 MCS-firefly_ Luciferase
GV608 MCS-firely_ Luciferase
GV486 CMV-left circular frame-MCS-right circular frame-EF1a-copGFP-SV40-Neomycin
GV485 CMV-left circular frame-MCS-right circular frame- SV40-neomycin
GV272 SV40-firefly_ Luciferase-MCS
GV238 MCS-firefly_ Luciferase
GV230 CMV-MCS-EGFP-SV40-Neomycin
慢病毒过表达 GV365 Ubi-MCS-3FLAG-CMV-EGFP
GV320 Ubi-MCS-3FLAG-SV40-Cherry
GV341 Ubi-MCS-3FLAG-SV40-puromycin
GV358 Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin
GV492 Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES -puromycin
慢病毒过表达Tet-on GV308 TetlP-MCS-3FLAG-Ubi-TetR-IRES-Puromycin
腺病毒过表达 GV345 CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry
GV314 CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP
腺相关病毒过表达 GV388 CMV bGlobin-MCS-EGFP-3FLAG-WPRE-hGH polyA
GV389 CMV bGlobin-MCS-mCherry-3FLAG-WPRE-hGH polyA
GV410 CMV bGlobin-MCS-3FLAG-T2A-EGFP
GV411 CMV-betaGlobin-MCS-3Flag-SV40 PolyA
GV461 CMV-betaGlobin-MCS-SV40 PolyA
GV467 CMV-betaGlobin-MCS-EGFP-3Flag-SV40 PolyA
GV489 CMV bGlobin-EGFP-MCS-WPRE-hGH polyA
GV466 hSyn promoter-MCS-EGFP-3FLAG-SV40 PolyA
GV475 hSyn promoter-MCS-mcherry-3FLAG-SV40 PolyA
GV488 gfaABC1D promoter-MCS-EGFP-WPRE-bGH PolyA

引用文献

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2. Liu J, Liu W, Yang L, et al. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding[J]. Cell Stem Cell, 2017, 21(5): 635-649. (IF= 25.269).开yun体育app官方下载产品:过表达质粒 研究领域:神经 中科院生物物理所


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5. He J, Bao Q, Zhang Y, et al. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells[J]. Circulation Research, 2018, 122(4): 591-605. (IF= 23.213).开yun体育app官方下载产品:过表达腺病毒 研究领域:血管生成 天津医科大学


6. Xiao C, Wang K, Xu Y, et al. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of miR-125b[J]. Circulation Research, 2018, 123(5): 564-578. (IF= 23.213).开yun体育app官方下载产品:过表达腺病毒 研究领域:心肌梗死 浙江大学第二附属医院


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8. Hou G, Chen L, Liu G, et al. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) opposes hepatocellular carcinoma progression by regulating AMP-activated protein kinase signaling in mice[J]. Hepatology, 2017, 65(5): 1628-1644. (IF= 13.246).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:肝癌 第二军医大学


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10. Shen Z C, Wu P F, Wang F, et al. Gephyrin Palmitoylation in Basolateral Amygdala Mediates the Anxiolytic Action of Benzodiazepine[J]. Biological Psychiatry, 2019, 85(3): 202-213. (IF= 12.81).开yun体育app官方下载产品:过表达AAV  研究领域:焦虑症 华中科技大学同济医学院


11. Li M X, Zheng H L, Luo Y, et al. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs[J]. Molecular Psychiatry, 2018, 23(3): 556-568. (IF= 13.437).开yun体育app官方下载产品:过表达AAV血清型:AAV1  研究领域:抑郁症 华中科技大学同济医学院


12.Han C L, Ge M, Liu Y P, et al. Long non-coding RNA H19 contributes to apoptosis of hippocampal neurons by inhibiting let-7b in a rat model of temporal lobe epilepsy[J]. Cell Death & Disease, 2018, 9(6): 617. (IF= 9.685).开yun体育app官方下载产品:干扰和过表达AAV血清型:AAV9  研究领域:颞叶癫痫 首都医科大学

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