慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种,基因组为单链RNA。但区别于一般的逆转录病毒,慢病毒具有更广的宿主范围,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。重组慢病毒载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I 型病毒)为基础,使用疱疹病毒VSVG 外壳蛋白发展起来的工具载体,其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。慢病毒可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。慢病毒可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,为神经领域、心血管领域、肝脏、肌肉、眼、肺、肿瘤及其他领域的科研工作者们提供更强有力的基因研究工具。
慢病毒与其他病毒工具比较,具有以下优势:
a.表达时间长:慢病毒通过将外源基因整合到宿主细胞基因组上,可实现目的基因长时间稳定的表达,不随着细胞分裂传代而丢失,是细胞实验的首选;
b.安全性高:未发现致病性,已被用于CAR-T治疗作用于人体;
c.免疫原性低:直接注射活体组织不易造成免疫反应,适用于动物实验。
病毒表达系统 |
腺病毒 (Adenovirus) |
慢病毒 (Lentivirus) |
腺相关病毒 (Adeno-Associate virus) |
病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA病毒 | 单链DNA病毒 |
复制 | 条件复制 | 不可复制 | 条件复制 |
滴度 | 最高可达1012pfu/ml | 最高可达109TU/ml | 最高可达1012-13v.g/ml |
感染细胞类型 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂不旺盛的细胞 |
表达丰度 | 高水平表达 | 中到高水平表达 | 高水平表达 |
表达时间 | 快(1-2天) | 慢(2-4天) | 1-2周 |
持续表达时间 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 瞬时表达外源基因 |
病毒基因组整合于宿主基因组, 长时间、稳定表达外源基因 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 在分裂旺盛的细胞中可长时间表达 |
克隆容量 | 适合表达小于5kb的外源片段 | 适合表达小于4kb的外源片段 | 适合表达小于2.8kb的外源片段 |
免疫原性 | 较高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
安全性 | 可能会引起一些咳嗽流涕 |
暂无发现致病性, 已被用于CAR-T治疗作用于人体 |
暂无发现致病性, 已通过欧盟和FDA许可, 用作基因治疗药物的载体 |
开yun体育app官方下载独有的病毒分级纯化工艺,满足您从永生化细胞到原代和干细胞,从动物体内水平到cGMP细胞治疗等不同实验需求:
A级慢病毒纯化工艺:
通过超速离心初步浓缩慢病毒颗粒,同时去除病毒上清中的血清蛋白和宿主蛋白,大部分质粒DNA和宿主DNA,然后应用超滤,进一步浓缩,去除质粒DNA和宿主DNA,获得高纯度慢病毒产品。
B级慢病毒纯化工艺:
通过切向流过滤系统,在浓缩慢病毒的同时,极大程度地去除DNA残留和蛋白残留,同时通过超滤进一步浓缩和纯化,获得超纯慢病毒产品。
慢病毒质量检测标准:
开yun体育app官方下载提供的慢病毒经过完善的检测,提供滴度1E+8~10TU/ml、无污染的病毒,将病毒样品送至专业检测机构,严格测定每一生产批次慢病毒的各项指标。
检测项目 | 检测方法 | 检测结果 | 单位 | 参考检测范围 |
支原体 | Nest PCR | 阴性 | .. | 阴性 |
内毒素 | LAL | 合格 | EU/mI | ≤50 |
衣原体 | 培养法 | 阴性 | .. | 阴性 |
细菌 | 培养法 | 阴性 | .. | 阴性 |
真菌 | 培养法 | 阴性 | .. | 阴性 |
活性滴度 | 绝对定量 | 1.00E+08 | TU/mI | ≥1E+8TU |
市场常见滴度检测方法比较
开yun体育app官方下载提供完善的慢病毒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下慢病毒载体可供您选择,点击查看载体图谱>>
调控方式 | 载体编号 | 元件顺序 | 原核抗性 | 真核抗性 |
荧光标记 启动子 |
荧光标记 |
RNAi/过表达 启动子 |
过表达 | GV365 |
Ubi-MCS-3FLAG -CMV-EGFP |
Ampicillin | 无 | CMV | GFP | Ubiquitin |
GV320 |
Ubi-MCS-3FLAG -SV40-Cherry |
Ampicillin | 天 | SV40 | Cherry | Ubiquitin | |
GV341 |
Ubi-MCS-3FLAG -SV40-puromycin |
Ampicillin | Puromycin | 无 | 无 | Ubiquitin | |
GV358 |
Ubi-MCS- 3FLAG -CMV-EGFP |
Ampicillin | Puromycin | SV40 | GFP | Ubiquitin | |
GV492 |
Ubi-MCS-3FLAG- CBh-gcGFP-IRES -puromycin |
Ampicillin | Puromycin | CBh | GFP | Ubiquitin | |
过表达 Tet-on |
GV308 |
TetllP-MCS-3FLAG -Ubi-TetR-IRES -Puromycin |
Ampicillin | Puromycin | 无 | 无 | TtlIP |
干扰 | GV112 |
hU6-MCS -CMV- Puromycin |
Ampicillin | Puromycin | 无 | 无 | U6 |
GV115 |
hU6-MCS-CMV- EGFP |
Ampicillin | 无 | CMV | GFP | U6 | |
GV248 |
hU6-MCS-Ubiquitin -EGFP-IRES- puromycin |
Ampicillin | Puromycin | Ubiquitin | GFP | U6 | |
GV298 |
U6-MCS-Ubiquitin -Cherry-IRES- puromycin |
Ampicillin | Puromycin | Ubiquitin | Cherry | U6 | |
GV493 |
hU6-MCS-CBh- gcGFP-IRES- puromycin |
Ampicillin | Puromycin | CBh | GFP | U6 | |
干扰Tet-on | GV307 |
TetlIP-TurboRFP -MCS(MIR30)-Ubi- TetR-IRES -Puromycin |
Ampicillin | Puromycin | TetlIP | RFP | TetlIP |
miRNA-up | GV369 |
Ubi-MCS-SV40 -EGFP-IRES -puromycin |
Ampicillin | Puromycin | SV40 | GFP | Ubiquitin |
GV209 |
H1-MCS-CMV -EGFP |
Ampicillin | 无 | CMV | GFP | H1 | |
GV309 |
hU6-MCS-Ubiquitin -EGFP-IRES -puromycin |
Ampicillin | Puromycin | Ubiquitin | GFP | U6 | |
miRNA-down | GV280 |
hU6-MCS-Ubiquitin -EGFP-IRES -puromycin |
Ampicillin | Puromycin | Ubiquitin | GFP | U6 |
GV234 |
hU6-MCS-CMV -EGFP |
Ampicillin | 无 | CMV | GFP | U6 |
1.细胞感染
慢病毒可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
2.在体注射
2.1神经系统
代表文献 开yun体育app官方下载客户文章Nature medicine,2010.16(12):1439-1443..
文献来源:Treatment of cerebral ischemia by disrupting ischemia-induced interaction of nNOS with PSD-95.
2.2肠组织
代表文献 开yun体育app官方下载客户文章Journal of Autoimmunity,2022,132:102872-102872
文献来源:He Q, Gao H, Chang Y L, et al. ETS-1 facilitates Th1 cell-mediated mucosal inflammation in inflammatory bowel diseases through upregulating CIRBP[J]. Journal of Autoimmunity, 2022, 132: 102872-102872.
2.3脑
代表文献 开yun体育app官方下载客户文章Autophagy,2022,18(11):2711-2730
文献来源:Xiao P, Gu J, Xu W, et al. RTN4/Nogo-A-S1PR2 negatively regulates angiogenesis and secondary neural repair through enhancing vascular autophagy in the thalamus after cerebral cortical infarction[J]. Autophagy, 2022, 18(11): 2711-2730.
2.4心血管系统
代表文献 开yun体育app官方下载客户文章Circulation,2016,134(22), 1752-1765(IF:39.918)
文献来源:Li P, Yin Y L, Guo T, et al. Inhibition of Aberrant MicroRNA-133a Expression in Endothelial Cells by Statin Prevents Endothelial Dysfunction by Targeting GTP Cyclohydrolase 1 in Vivo[J]. Circulation, 2016, 134(22): 1752-1765.
1. Wang J, Zhao D, Lei Z, et al. TRIM27 maintains gut homeostasis by promoting intestinal stem cell self-renewal[J]. Cellular & Molecular Immunology, 2023, 20(2):158-174. (IF= 22.096).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:免疫学中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室
2. Li B, Xi W, Bai Y, et al. FTO-dependent m6A modification of Plpp3 in circSCMH1-regulated vascular repair and functional recovery following stroke[J]. Nature Communication, 2023, 14(1): 489. (IF= 17.694).开yun体育app官方下载产品:RNAi慢病毒 研究领域:血管修复东南大学医学院
3.Cai Z, Chen J, Yu Z, et al. BCAT2 Shapes a Noninflamed Tumor Microenvironment and Induces Resistance to Anti-PD-1/PD-L1 Immunotherapy by Negatively Regulating Proinflammatory Chemokines and Anticancer Immunity[J]. Advanced Science, 2023 , 15: e2207155. (IF= 17.521).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:免疫学 中南大学湘雅医院泌尿外科
4.Gong Y, Zou S, Deng D, et al. Loss of RanGAP1 drives chromosome instability and rapid tumorigenesis of osteosarcoma[J]. developmental cell, 2023, 58(3): 192-210. (IF= 13.417).开yun体育app官方下载产品:RNAi慢病毒 研究领域:肿瘤 南方医科大学基础医学院
5.Xu Z, Gao Z, Fu H, et al. PTX3 from vascular endothelial cells contributes to trastuzumab-induced cardiac complications[J]. Cardiovascular Research, 2023, 18: cvad012. (IF= 13.081).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:心脏并发症 浙江大学药学院药物安全评价研究中心
6.Hou G, Chen L, Liu G, et al. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) opposes hepatocellular carcinoma progression by regulating AMP-activated protein kinase signaling in mice[J]. Hepatology, 2017, 65(5): 1628-1644. (IF= 17.298).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:肝癌 第二军医大学
7.Sun Z J, Chang D Y, Chen M, et al. Deficiency of CFB attenuates renal tubulointerstitial damage by inhibiting ceramide synthesis in diabetic kidney disease[J]. JCI Insight, 2022, 7(24): e156748. (IF= 19.456).开yun体育app官方下载产品:过表达慢病毒 研究领域:糖尿病肾病 北京大学第一医院内科肾脏科
8.Li Q, Zhang L, You W, et al. PRDM1/BLIMP1 induces cancer immune evasion by modulating the USP22-SPI1-PD-L1 axis in hepatocellular carcinoma cells[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7677. (IF= 17.694).开yun体育app官方下载产品:RNAi慢病毒和过表达慢病毒 研究领域:免疫逃逸 南京医科大学附属第一医院肝胆中心
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